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EGFR基因檢測專(zhuān)家共識,推動(dòng)肺癌精準治療

2017-12-26 來(lái)源:轉化醫學(xué)網(wǎng)  標簽: 掌上醫生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護膚
摘要:為了使發(fā)生假陰性結果的幾率最小化,推薦高敏感度的檢測方法應用于ctDNA樣本的EGFR突變檢測

 

 
  近年來(lái),隨著(zhù)醫學(xué)診斷技術(shù)特別是分子診斷技術(shù)的不斷提高,針對肺癌的新的驅動(dòng)基因不斷被發(fā)現,基于驅動(dòng)基因的新型靶向藥物不斷涌現,肺癌精準治療成為了關(guān)注的熱點(diǎn)。在此背景下,《非小細胞肺癌(NSCLC)血液EGFR基因突變檢測中國專(zhuān)家共識》于2015年12月8日在中華醫學(xué)會(huì )會(huì )刊《中華醫學(xué)雜志》上發(fā)表。
 
  近年來(lái),隨著(zhù)醫學(xué)診斷技術(shù)特別是分子診斷技術(shù)的不斷提高,針對肺癌的新的驅動(dòng)基因不斷被發(fā)現,基于驅動(dòng)基因的新型靶向藥物不斷涌現,肺癌精準治療成為了關(guān)注的熱點(diǎn)。在此背景下,《非小細胞肺癌(NSCLC)血液EGFR基因突變檢測中國專(zhuān)家共識》于2015年12月8日在中華醫學(xué)會(huì )會(huì )刊《中華醫學(xué)雜志》上發(fā)表。該共識由筆者及專(zhuān)家小組精心籌備并完稿,也是中國第一個(gè)NSCLC血液EGFR基因突變檢測專(zhuān)家共識,旨在規范中國肺癌EGFR血檢,推動(dòng)血檢在全國范圍內的廣泛應用,促進(jìn)中國肺癌的精準治療。
 
  《NSCLC血液EGFR基因突變檢測中國專(zhuān)家共識》的主要內容
 
  近年來(lái),表皮生長(cháng)因子受體-酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKIs)等靶向藥物已經(jīng)成為晚期肺癌患者重要的治療方式之一。EGFR突變檢測是晚期肺癌患者使用EGFR-TKIs治療的先決條件。目前包括美國國立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò )(NCCN)、歐洲臨床腫瘤學(xué)會(huì )(ESMO)及中國肺癌EGFR基因突變檢測專(zhuān)家共識等指南均一致建議,肺癌患者應常規進(jìn)行EGFR檢測。然而,我國的EGFR檢測在肺癌患者中的受檢率相對偏低。張力等報道,2012年我國肺癌EGFR突變受檢率約為20%~30%,明顯低于發(fā)達國家或地區的受檢率。未進(jìn)行檢測最常見(jiàn)的原因主要在于缺乏足夠的腫瘤組織、病理組織學(xué)類(lèi)型的限制(如鱗癌)和檢測周期過(guò)長(cháng)。如何在我國提高EGFR等基因變異受檢率是提升我國肺癌精準診治的關(guān)鍵因素之一。
 
  研究顯示大部分(非全部)晚期NSCLC患者的血液中存在循環(huán)游離DNA(cellfreeDNA,cfDNA)。cfDNA主要來(lái)源于凋亡或壞死的細胞,包括正常細胞和腫瘤細胞,如果來(lái)自腫瘤細胞則稱(chēng)為循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)。
 
  既往系列研究已在NSCLC患者的血漿或血清樣本的ctDNA中發(fā)現EGFR突變,初步顯示外周血ctDNAEGFR突變檢測及對EGFR-TKIs療效預測的可行性。IPASS研究通過(guò)擴增阻滯突變系統(ARMS)法檢測日本亞組人群血清游離DNA的EGFR突變狀況與臨床療效的研究數據顯示,血清游離DNAEGFR突變陽(yáng)性患者接受吉非替尼治療后的無(wú)進(jìn)展生存期(PFS)較標準化療患者顯著(zhù)更長(cháng)。IFUM研究也提供了在高加索人群中基于血漿游離DNA檢測(ARMS檢測)發(fā)現的EGFR突變陽(yáng)性患者接受吉非替尼治療NSCLC的療效證據,在腫瘤組織陽(yáng)性(此組包括血漿陽(yáng)性與陰性患者)、腫瘤組織和血漿標本均陽(yáng)性及腫瘤組織陽(yáng)性而血漿標本陰性三組中,其客觀(guān)緩解率分別為70%、76.9%和59.5%。而230例中國晚期NSCLC組織與血漿游離DNA配對分析等研究同樣顯示,血液標本EGFR突變對于預測靶向藥物治療的臨床獲益與組織突變者高度一致。
 
  與腫瘤組織相比,ctDNA中EGFR突變檢測具有顯著(zhù)的特異度(IPASS、IFUM和IGNITE研究中的特異度分別為100%、99.8%和97.2%),但敏感度相對較低(分別為43.1%、65.7%和49.6%);這可能與腫瘤分期、血液標本的處理、EGFR檢測方法差異等相關(guān)。
 
  歐洲藥物管理局(EMA)和中國食品藥品監督管理總局(CFDA)于2014年9月和2015年2月先后批準對吉非替尼說(shuō)明書(shū)進(jìn)行更新,在推薦所有NSCLC患者均應接受腫瘤組織EGFR突變檢測的基礎上,補充了如果腫瘤標本不可評估,則可使用從血液(血漿)標本中獲得的ctDNA進(jìn)行評估,盡可能明確最可能從吉非替尼治療中受益的NSCLC患者。
 
  血液EGFR基因突變檢測的標本采集及處理
 
  全血中血漿和血清均能分離出ctDNA,但通過(guò)和相匹配的血清樣本比較后發(fā)現,血漿中ctDNA有更高的檢出率。
 
  為了采集到最佳血漿標本用于后續提取游離DNA進(jìn)行EGFR突變檢測,建議使用如下兩種方法之一采集10ml全血并進(jìn)一步分離血漿。
 
  1、使用含有游離DNA保護劑及防細胞裂解保護劑的專(zhuān)用常溫采血管采集全血,采集后后輕搖混勻,常溫(6~30℃)放置不超過(guò)5~7d;以足夠的離心力將全血充分離心兩次,分離出不含細胞成分的血漿,放置于-70℃凍存直至DNA抽提,或直接進(jìn)入DNA抽提步驟。
 
  2、用常規EDTA抗凝管(嚴禁使用肝素抗凝管)采集全血后,兩小時(shí)內以足夠的離心力將全血充分低溫離心兩次,分離出不含細胞成分的血漿,放置于-70℃凍存直至DNA抽提,或直接進(jìn)入DNA抽提步驟??紤]到臨床實(shí)踐的方便性,建議盡量采用第一種方案采集10ml全血。此外應注意,血漿分離過(guò)程中應注意避免吸入白細胞。
 
  血液EGFR基因突變檢測的外周血游離DNA提取
 
  因ctDNA含量低,為了提高EGFR突變的檢出率,在臨床允許的情況下可增加血漿用量,建議使用10ml全血分離出的血漿(4~5ml)。
 
  目前,外周血游離DNA的提取有很多種方法,建議采用國家藥監部門(mén)批準的、大容量血漿游離DNA分離試劑盒來(lái)提取游離DNA。
 
  血液EGFR基因突變檢測的方法
 
  為了使發(fā)生假陰性結果的幾率最小化,推薦高敏感度的檢測方法應用于ctDNA樣本的EGFR突變檢測。目前,檢測基因突變最常用的方法是ARMS法,歐盟批準用于指導吉非替尼治療的血液檢測的方法也是ARMS檢測法。檢測必須在具有資質(zhì)的檢測中心進(jìn)行。檢測方法必須進(jìn)行嚴格的驗證及質(zhì)控。檢測試劑須使用經(jīng)歐盟批準的檢測試劑盒。本共識專(zhuān)家組也推薦EGFR檢測應在具有資質(zhì)的檢測中心進(jìn)行,檢測方法必須進(jìn)行嚴格的驗證及質(zhì)控,檢測試劑須使用經(jīng)CFDA批準的檢測試劑盒。
 
  血液EGFR基因突變檢測的報告及周期
 
  檢測報告應包括檢測結果(包括明確的病理診斷及專(zhuān)業(yè)的書(shū)寫(xiě))及對結果的詮釋?zhuān)夷軌虮荒[瘤科醫師或其他非病理專(zhuān)業(yè)的醫師理解。所有專(zhuān)業(yè)化EGFR分子檢測實(shí)驗室,通過(guò)建立高效率的分子檢測平臺,對流程進(jìn)行優(yōu)化,從接收標本到發(fā)出報告,建議不超過(guò)3~5個(gè)工作日,從而及時(shí)滿(mǎn)足臨床的需求。
 
  小結
 
  隨著(zhù)檢測技術(shù)的發(fā)展,在保證現有檢測特異性和預測準確性的基礎上,不斷提高血液EGFR檢測的靈敏度,將有助于整體上提高我國肺癌患者的EGFR基因受檢率,從而使更多的患者接受精準的靶向治療。
 
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