當前CRISPR/Cas9已被成功改造成基因組定點(diǎn)編輯工具。因此,如何利用CRISPR/Cas9系統對HIV-1病毒基因進(jìn)行高效靶向修飾,從而達到治療HIV-1感染病患的目的成為了國內外許多實(shí)驗室的研究熱點(diǎn)。
2015年10月,來(lái)自吉林大學(xué)和斯坦福大學(xué)的研究人員,利用一種工程設計的CRISPRCsy4RNA內切核糖核酸酶,來(lái)抑制HIV-1病毒感染。相關(guān)研究結果發(fā)表在國際學(xué)術(shù)期刊《PLOSONE》上。
哺乳動(dòng)物細胞編碼的限制因子,可以限制HIV-1和其他病毒的復制。不過(guò),被病毒感染的細胞往往不表達這樣的限制因子。人們普遍認為,誘導宿主限制因子的表達是抑制病毒復制的一個(gè)潛在途徑。杜克大學(xué)的BryanR.Culle領(lǐng)導研究團隊在CRISPR/Cas9的基礎上構建了轉錄激活子,成功讓人類(lèi)細胞表達了自己缺乏的限制因子(A3G和A3B)。這項研究發(fā)表在2015年12月的PNAS雜志上。
HIV是一種有效和狡猾的逆轉錄病毒。一旦HIV將其DNA導入宿主細胞基因組,它就有一段很長(cháng)的潛伏期,并能保持休眠狀態(tài)潛伏很多年。雖然醫生可以調制相匹配的抗逆轉錄病毒藥物雞尾酒,來(lái)抑制病毒,但是如果停止治療病毒又會(huì )再度復活。為了使潛伏性HIV變得完全無(wú)害,美國麻省大學(xué)醫學(xué)院的研究人員利用Cas9/CRISPR——一種強大的基因編輯工具,開(kāi)發(fā)出一種新型技術(shù),有可能將潛在病毒的DNA從被感染細胞中去除。
然而,根據發(fā)表在4月7日《CellReports》雜志上的一項研究,在將CRISPR/Cas9用作有效的抗病毒藥物之前,或許還需要對這一基因編輯平臺進(jìn)行稍微的調整。利用CRISPR/Cas9突變細胞DNA內HIV-1的研究人員發(fā)現,盡管單突變可以抑制病毒復制,一些也可以導致意外的抵抗。研究人員認為,靶向多個(gè)病毒DNA區域對于有效實(shí)現CRISPR/Cas9的潛在抗病毒能力或許是必要的。
一旦進(jìn)入到細胞中,HIV的RNA基因組會(huì )轉變?yōu)镈NA,與細胞DNA纏繞在一起。由此可以編程CRISPR/Cas9來(lái)靶向一段DNA序列,切割病毒DNA。問(wèn)題是,HIV極擅長(cháng)攜帶新突變存活及旺盛生長(cháng),因此盡管許多的病毒被這種靶向方法所殺死,逃避CRISPR/Cas9治療的HIV會(huì )變得更難靶向。
論文的資深作者、麥吉爾大學(xué)艾滋病中心副教授、猶太綜合醫院LadyDavis研究所的高級研究員梁晨(ChenLiang,音譯)說(shuō):“當我們測序逃脫HIV的病毒RNA時(shí),驚訝地發(fā)現病毒的大多數突變都恰好排列在Cas9切割DNA的位點(diǎn),這直接表明了這些突變是修復斷裂DNA時(shí)細胞非同源末端連接機器所介導,而非病毒逆轉錄酶的錯誤所致。”
“一些突變很小,只有單核苷酸,但這一突變改變了序列,使得Cas9不再能夠識別它。這樣的突變不會(huì )損傷病毒,因此這些抵抗病毒仍然可以復制。”
這項由麥吉爾大學(xué)、蒙特利爾大學(xué)、中國醫學(xué)科學(xué)院和北京協(xié)和醫學(xué)院的研究人員協(xié)作完成的研究,為希望將CRISPR/Cas9用作為一種抗病毒藥物的人提供了一個(gè)警示故事。梁晨不認為這些努力是徒勞的,因為有一些策略可以克服這一限制。例如,利用CRISPR/Cas9或Cas9以外的其他酶來(lái)靶向多個(gè)位點(diǎn)。一旦確定了一種解決方案,下一個(gè)障礙將是找到一些方法向患者遞送治療物。
梁晨說(shuō):“不僅是HIV-1,CRISPR/Cas9為許多其他的病毒找到一種治愈方法帶來(lái)了新希望。朝著(zhù)這一目標,我們還有一條漫長(cháng)的路要走,有許多的障礙和限制需要我們去克服,但我們有信息將會(huì )獲得成功。”
用于風(fēng)濕性及類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節炎、腰肌勞損、肩周炎、四肢扭傷、挫傷等。
健客價(jià): ¥38益氣養陰,安神。用于氣陰不足所致的失眠多夢(mèng),心悸氣短,久病體弱。
健客價(jià): ¥22.5-治療HIV陽(yáng)性或免疫系統損害患者的口腔和/或食道念珠菌病。 -對血液系統腫瘤、骨髓移植患者和預期發(fā)生中性粒細胞減少癥(亦即<500細胞/μ1)的患者,可預防深部真菌感染的發(fā)生。 -對于伴有發(fā)熱的中性粒細胞減少癥患者,疑為系統性真菌病時(shí),可作為伊曲康唑注射液經(jīng)驗治療的序慣療法。
健客價(jià): ¥688扶正固本,滋陰壯陽(yáng),解毒散結。用于陰陽(yáng)兩虛所致的神疲乏力,頭暈耳鳴,健忘失眠,腰膝酸痛,陽(yáng)痿早泄,夜尿頻多及癌癥放療、化療的的輔助治療。
健客價(jià): ¥25用于風(fēng)濕性及類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節炎、腰肌勞損、肩周炎、四肢扭傷、挫傷等。
健客價(jià): ¥199治療抑郁障礙,治療伴有或不伴有廣場(chǎng)恐怖癥的驚恐障礙。
健客價(jià): ¥102本品為非甾體抗炎藥。臨床可用于下列情況。 1、鎮痛、解熱:可緩解輕度或中度的疼痛,如頭痛、牙痛、神經(jīng)痛、肌肉痛及月經(jīng)痛,也用于感冒和流感等退熱。本品僅能緩解癥狀,不能治療引起疼痛和發(fā)熱的病因,故需同時(shí)應用其他藥物對病因進(jìn)行治療。 2、抗炎、抗風(fēng)濕:為治療風(fēng)濕熱的常用藥物,用藥后可解熱、使關(guān)節癥狀好轉并使血沉下降,但不能去除風(fēng)濕熱的基本病理改變,也不能治療和預防心臟損害及其他合并癥。 3、關(guān)節炎:除
健客價(jià): ¥3本品為非甾體抗炎藥。臨床可用于下列情況。1. 鎮痛、解熱:可緩解輕度或中度的疼痛,如頭痛、牙痛、神經(jīng)痛、肌肉痛及月經(jīng)痛,也用于感冒和流感等退熱。本品僅能緩解癥狀,不能治療引起疼痛和發(fā)熱的病因,故需同時(shí)應用其他藥物對病因進(jìn)行治療。2. 抗炎、抗風(fēng)濕:為治療風(fēng)濕熱的常用藥物,用藥后可解熱、使關(guān)節癥狀好轉并使血沉下降,但不能去除風(fēng)濕熱的基本病理改變,也不能治療和預防心臟損害及其他合并癥。3.關(guān)節炎:除風(fēng)
健客價(jià): ¥4.5冠心病的長(cháng)期治療;心絞痛的預防;心肌梗死后持續心絞痛的治療;與洋地黃和/或利尿劑聯(lián)合應用,治療慢性充血性心力衰竭。
健客價(jià): ¥76用于防治血栓栓塞,降低心肌梗塞、腦血栓的形成以及慢性心絞痛的治療;也可用于外科手術(shù)后的心瓣膜病及人工瓣膜手術(shù)后原發(fā)性、復發(fā)性血栓靜脈炎等。
健客價(jià): ¥25抗血栓:本品對血小板聚集的抑制作用,可防止血栓形成,臨床用于預防一過(guò)性腦缺血發(fā)作、心肌梗死、心房顫動(dòng)、人工心臟瓣膜、動(dòng)靜脈痿或其他手術(shù)后的血栓形成。也可用于治療不穩定性心絞痛。
健客價(jià): ¥17抗血栓:本品對血小板聚集有抑制作用,可防止血栓形成,臨床用于預防一過(guò)性腦缺血發(fā)作、心肌梗死、心房顫動(dòng)、人工心臟瓣膜、動(dòng)靜脈瘺或其他手術(shù)后的血栓形成。也可用于治療不穩定型心絞痛。
健客價(jià): ¥9.5本品為非甾體抗炎藥。臨床可用于抗血栓:本品對血小板聚集有抑制作用,可防止血栓形成,臨床用于預防一過(guò)性腦缺血發(fā)作、心肌梗死、心房顫動(dòng)、人工心臟瓣膜、動(dòng)靜脈瘺或其他手術(shù)后的血栓形成。也可用于治療不穩定型心絞痛。
健客價(jià): ¥7.7益氣養陰,活血通絡(luò ),清心安神。用于治療氣陰兩虛,心絡(luò )瘀阻引起的冠心病室性早搏,癥見(jiàn)心悸不安,氣短乏力,動(dòng)則加劇,胸部悶痛,失眠多夢(mèng),盜汗,神倦懶言。
健客價(jià): ¥27益氣養陰,活血通絡(luò ),清心安神。用于治療冠心病室性早搏屬氣陰兩虛,心絡(luò )瘀阻證,癥見(jiàn)心悸不安,氣短乏力,動(dòng)則加劇,胸部悶痛,失眠多夢(mèng),盜汗,神倦懶言。
健客價(jià): ¥61用于輕~中度急慢性潰瘍性結腸炎的治療。
健客價(jià): ¥32用于各型精神分裂癥,更適用于病情緩解者的維持治療。
健客價(jià): ¥151.治療因創(chuàng )傷、外科手術(shù)等引起的軟組織損傷腫脹。癥狀如:扭挫傷、骨折、慢性勞損、燒燙傷、整形手術(shù)、靜脈曲張、靜脈炎、淋巴回流障礙等各種原因所致軟組織損傷腫脹。 2.治療各期內痔、混合痔、炎性外痔、血栓性外痔等各種類(lèi)型痔引起的出血、脫出、疼痛、腫脹、瘙癢等。也可用于痔手術(shù)后腫脹、疼痛的治療。
健客價(jià): ¥501.治療因創(chuàng )傷、外科:F術(shù)等引起的軟組織損傷腫脹。癥狀如:骨折、整形手術(shù)、靜脈曲張、靜脈炎等各種原兇所致軟組織損傷腫脹。2.治療各期內痔、炎性外痔、血栓性外痔等各種類(lèi)型痔引起的出血、疼痛、腫脹等。
健客價(jià): ¥30治療抑郁障礙,治療伴有或不伴有廣場(chǎng)恐怖癥的驚恐障礙。
健客價(jià): ¥47補氣活血解毒。用于氣虛血瘀證為主要臨床表現的肺癌、胃癌的輔助治療。
健客價(jià): ¥83.5扶正固本,滋陰壯陽(yáng),解毒散結。用于陰陽(yáng)兩虛所致的神疲乏力,頭暈耳鳴,健忘失眠,腰膝酸痛,陽(yáng)痿早泄,夜尿頻多及癌癥放療、化療的的輔助治療。
健客價(jià): ¥88