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檢測肺癌病人microRNA新方法

2016-01-14 來(lái)源:健客網(wǎng)社區  標簽: 掌上醫生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護膚
摘要:MicroRNAs(miRNAs)是一類(lèi)非編碼RNAs,長(cháng)約19-24個(gè)核苷酸,通過(guò)與mRNA的3‘端非翻譯區結合調控基因的表達。

  最近,來(lái)自意大利腫瘤研究中心(FondazioneIRCCSIstitutoNazionaledeiTumori)的研究團隊在BMCGenomics雜志上發(fā)表了一篇最新研究進(jìn)展,他們首次利用QuantStudio3DdigitalPCR對肺癌病人的microRNA進(jìn)行定量檢測,這項技術(shù)有希望成為癌癥臨床研究中miRNAs分析的常規檢測方法。

  MicroRNAs(miRNAs)是一類(lèi)非編碼RNAs,長(cháng)約19-24個(gè)核苷酸,通過(guò)與mRNA的3‘端非翻譯區結合調控基因的表達。已有研究發(fā)現,在血漿、血清、唾液、、尿液等不同標本本中均能檢測到了循環(huán)miRNA(circulatingmiRNAs),循環(huán)miRNA的表達水平與癌癥進(jìn)展,治療反應和患者生存期密切相關(guān),表明循環(huán)miRNA是一種非常有潛力的無(wú)創(chuàng )生物標記物,可用于癌癥等重大疾病的早期診斷和預后評估等。但是由于研究數據來(lái)源于不同的實(shí)驗方法和技術(shù),目前還沒(méi)有統一的均一化方法處理數據,阻礙了循環(huán)miRNA研究的發(fā)展。

  QuantStudio3DdigitalPCR是一種基于芯片的數字PCR技術(shù),無(wú)需標準品就能精準地絕對定量核酸分子。文章中研究人員使用digitalPCR,可以對200ul血漿中的循環(huán)miRNA進(jìn)行絕對定量,實(shí)驗方法和流程如下:

  在血漿樣本、肺癌組織和細胞系中,研究人員對5個(gè)與肺癌發(fā)生相關(guān)的miRNA(mir-16-5p,mir-21-5p,mir-126-3p,mir-486-5pandmir-660-5p)表達水平進(jìn)行絕對定量,并驗證了mir-16-5p在正常肺組織和肺癌樣本中的表達有顯著(zhù)差異。

  為了驗證該方法的可重復性,對5個(gè)不同樣本進(jìn)行平行重復實(shí)驗和獨立實(shí)驗,結果顯示intra-run和inter-run變異系數在4%左右,表明digitalPCR可重復性很好。

  綜上所述,digitalPCR可以絕對定量不同生物學(xué)標本的miRNA表達水平,例如肺癌病人的血漿或組織,有利于推動(dòng)miRNA作為新型生物標記物的研究。

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