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cell reports:癌癥疫苗新型佐劑探索

2015-05-14 來(lái)源:健客網(wǎng)社區  標簽: 掌上醫生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護膚
摘要:顆粒狀物質(zhì)作為佐劑具有天然的優(yōu)勢:剛性的形狀與大小能夠增強其攜帶抗原的免疫原性,能夠更特異地針對某一特定部位的細胞類(lèi)群,并且能夠保護抗原在胞外免受酶解。扁平的可透性微小硅顆粒(PSM)就是典型的代表。

  癌癥免疫療法是目前臨床癌癥治療中的新型潮流。FDA最近批準了針對轉移性前列腺癌的樹(shù)突狀細胞免疫療法以及利用免疫抑制阻斷型抗體PD-1,CTLA-4的免疫檢查點(diǎn)療法。盡管有這些突破,目前的癌癥免疫療法還是存在諸多限制。比如腫瘤疫苗釋放效率低下,腫瘤組織特異性抗原的交叉呈遞受阻,一系列的免疫抑制性細胞因子的作用,等等。

  先天免疫是抗腫瘤免疫的重要組成部分,因此介導先天免疫與后天免疫的信號分子能夠作為抗癌的治療靶點(diǎn)。樹(shù)突狀細胞(DC)是一類(lèi)專(zhuān)門(mén)進(jìn)行抗原呈遞的細胞類(lèi)型。在交叉呈遞反應中,MHC-I的抗原在胞內體中進(jìn)行加工,并通過(guò)外界的先天免疫信號激活胞內的TAP蛋白,使得MHC-I與抗原復合體形成。之前的研究大多集中在可溶性的抗原,對于顆粒狀的抗原物質(zhì)其交叉呈遞的機制是否如此并不清楚。

  顆粒狀物質(zhì)作為佐劑具有天然的優(yōu)勢:剛性的形狀與大小能夠增強其攜帶抗原的免疫原性,能夠更特異地針對某一特定部位的細胞類(lèi)群,并且能夠保護抗原在胞外免受酶解。扁平的可透性微小硅顆粒(PSM)就是典型的代表。

  在最近的一項研究中,來(lái)自美國休斯敦Methodist研究所的HaifaShen課題組在《cellreports》上發(fā)表了一篇文章,介紹了PSM作為癌癥疫苗佐劑對DC激活的機制。

  首先,作者利用PSM包裹了帶有熒光標記(FITC)的OVA抗原,然后在體外與DC細胞系共孵育。結果顯示,在極短的時(shí)間內(30分鐘),這些顆粒復合物能夠充分被DC所吞噬。加入吞噬抑制劑cytochalasinD或者大胞飲抑制劑amiloride后,內吞的效率明顯下降。這說(shuō)明吞噬以及大胞飲都參與了細胞內吞PSM的過(guò)程。

  之后,作者檢測了DC對PSM包裹的OVA或者可溶性的OVA抗原的交叉呈遞效率。他們通過(guò)將PSM復合體或可溶性OVA刺激過(guò)的DC與天然的CD8+T細胞(只能被MHC-I識別并激活)共同孵育,并比較了最終的CD8+T細胞的激活程度。結果顯示,PSM包裹的OVA抗原相比于可溶性的OVA能夠使T細胞產(chǎn)生更多的IL-2。

  接下來(lái),作者觀(guān)察了PSM在被細胞吞噬后在胞內的移動(dòng)情況。通過(guò)成像的手段,他們發(fā)現PSM集中在早期的內吞小體(earlyendosome),而極少幾率出現在晚期內吞小體(lateendosome)或回收內吞小體(recyclingendosome)中。而與此不同,可溶性的OVA抗原在進(jìn)入細胞后會(huì )快速降解,熒光信號逐漸消失。作者之后分別用蛋白酶體抑制劑MG-132與epoxomicin,溶酶體抑制劑leupeptin進(jìn)行干預。結果顯示:對于可溶性抗原,蛋白酶體抑制劑能夠抑制其交叉呈遞,然而對于PSM抗原,溶酶體抑制劑與蛋白酶體抑制劑均能夠抑制。之后作者通過(guò)TAP敲除小鼠證明了PSM抗原的交叉呈遞是經(jīng)典的信號通路。通過(guò)利用特異性識別OVA-MHC-I抗原復合體的抗體進(jìn)行標記,作者發(fā)現經(jīng)過(guò)PSM刺激后的DC表面表達更多的抗原復合體蛋白。

  通過(guò)轉錄水平的分析,作者發(fā)現PSM抗原刺激相比于可溶性抗原刺激并不能提高炎性因子的表達水平,也不能促進(jìn)DC的成熟(CD86,CD80的表達)。那么是什么原因使得DC交叉呈遞的水平提高了呢?進(jìn)一步分析,作者發(fā)現PSM的刺激能夠提高DC表達I型干擾素的水平。之前的文章已經(jīng)報道過(guò)I型干擾素能夠促進(jìn)交叉呈遞與CD8+T細胞的活化。這與作者的預期相符。

  通過(guò)遺傳手段分析不同缺失突變的小鼠,作者發(fā)現該I型干擾素的上升依賴(lài)于先天免疫的關(guān)鍵蛋白分子TIRF與MAVS。

  最后,作者通過(guò)體內實(shí)驗證明PSM包裹的抗腫瘤疫苗能夠明顯抑制小鼠乳腺腫瘤的生長(cháng)。以上事實(shí)證明了PSM是一類(lèi)潛在的抗腫瘤疫苗佐劑。

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