目的研究MAPK信號通路調控長(cháng)波紫外線(xiàn)(UVA)誘導皮膚成纖維細胞組織蛋白酶K(CatK)的表達。
方法原代培養的皮膚成纖維細胞取自?xún)和?。Western印跡檢測10J/cm2UVA照射前及照射后0.75、1.5、3和6h皮膚成纖維細胞中磷酸化JNK(p-JNK)、JNK、磷酸化P38(p-P38)、P38蛋白的表達。800nmol/LSP600125(SP)、10μmol/LSB203580(SB)分別孵育皮膚成纖維細胞,實(shí)驗分為無(wú)UVA照射的對照組、SP組、SB組及10J/cm2UVA照射的對照(UVA)組、UVA-SP組、UVA-SB組。先以Western印跡檢測各組UVA照射后1.5h磷酸化c-Jun(p-c-Jun)和磷酸化MAPKAPK2(p-MAPKAPK2)表達,再以RT-PCR和Western印跡檢測各組照射后48hCatKmRNA、蛋白的表達。
結果皮膚成纖維細胞在UVA照射后0.75、1.5h,p-JNK表達的灰度值分別為4.77±0.19和4.68±0.09,p-P38分別為2.44±0.13、2.30±0.04,均較照射前(p-JNK為3.2±0.27,p-P38為1.61±0.08)顯著(zhù)升高(均P<0.05);而在照射后3、6h的表達與照射前相比差異無(wú)統計學(xué)意義(P>0.05)。p-c-Jun在UVA-SP組表達(2.55±0.48)、p-MAPKAPK2在UVA-SB組表達(1.16±0.12)均顯著(zhù)低于UVA組(分別為4.85±0.96和2.46±0.09),均P<0.05。UVA-SP組、UVA-SB組CatKmRNA、蛋白的表達分別降為UVA組的38.9%、28.7%和55.7%、49.6%(P<0.05),UVA-SP組CatKmRNA、蛋白的表達也均顯著(zhù)低于UVA-SB組(P<0.05)。
結論JNK和P38信號通路在調控UVA上調的皮膚成纖維細胞CatK表達中起重要作用。