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腫瘤生物標志物開(kāi)發(fā)的新技術(shù)

2018-01-09 來(lái)源:健客社區  標簽: 掌上醫生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護膚
摘要:腫瘤個(gè)體化治療的基礎在于能否發(fā)現有效的生物標志物,而信號通路關(guān)鍵蛋白在其中占了很大比重。

   絕大多數實(shí)體腫瘤的發(fā)生發(fā)展,都無(wú)法歸咎于單基因突變,而是信號通路網(wǎng)絡(luò )中多個(gè)基因相互影響的結果。因此在腫瘤個(gè)體化醫療上,基因測序僅限于某些靶向藥物療效的預測,如對于EGFR基因突變的非小細胞性肺癌患者,可使用易瑞沙治療,但這部分患者的數量不足30%。對于無(wú)基因突變的患者或者非靶向藥物治療的腫瘤個(gè)體化治療而言,基因測序對于預測療法是否有效并無(wú)太大意義,有望取而代之的則是檢測失調的信號網(wǎng)絡(luò )中的關(guān)鍵蛋白質(zhì)(尤其是其活性形式,如磷酸化水平)的變化。

 
  為了滿(mǎn)足微量樣品中蛋白質(zhì)的檢測要求,美國proteinsimple公司開(kāi)發(fā)了微流蛋白免疫分析技術(shù)(NIA,即NanoPro)。斯坦福大學(xué)Felsher組的研究人員率先在NatureMedicine上發(fā)表了NanoPro用于多種臨床腫瘤樣本中的蛋白質(zhì)定性及定量分析的文章。他們選擇NanoPro,正是由于其所需樣品量少,通過(guò)穿刺活檢獲得的樣品即可滿(mǎn)足檢測所需,通過(guò)在不同的時(shí)間點(diǎn)取樣,能進(jìn)行藥物療效監測。
 
  NanoPro檢測原理是基于每種蛋白質(zhì)都帶有電荷,稱(chēng)為等電點(diǎn)。當蛋白質(zhì)等電點(diǎn)與溶液pH值相同時(shí)就不再帶電。蛋白質(zhì)在pH梯度膠(由兩性電解質(zhì)組成)中根據等電點(diǎn)進(jìn)行分離時(shí),磷酸化異構體通常比非磷酸化異構體含有更多的負電荷,即pH更小,因此通過(guò)等電分離就可將磷酸化和非磷酸化區分開(kāi)來(lái),后續利用免疫學(xué)檢測技術(shù)即可檢測感興趣的靶蛋白。整個(gè)實(shí)驗無(wú)需磷酸化特異性抗體,即可觀(guān)察磷酸化和非磷酸化的百分比含量。因為實(shí)驗所用的是通用抗體,更可讓研究人員觀(guān)察到靶蛋白的整個(gè)異構體譜圖,從而幫助發(fā)現新的異構體。
 
  在立普妥治療低分化淋巴瘤的II期臨床試驗中,Felsher組的研究人員通過(guò)NanoPro發(fā)現與對照組相比,藥物組的患者腫瘤細胞中磷酸化STAT3和STAT5水平都會(huì )明顯降低,這兩個(gè)靶點(diǎn)有望成為藥物療效預測指標。
 
  隨著(zhù)Felsher組的文章報道,不少敏銳的研究人員認識到NanoPro的獨特價(jià)值,并開(kāi)始用其觀(guān)察腫瘤相關(guān)蛋白質(zhì)的完整譜圖,以期發(fā)現潛在的腫瘤生物標志物。其中MD安德森癌癥中心、勞倫斯伯克利國家實(shí)驗室都接連發(fā)現在多種腫瘤中常見(jiàn)的AKT家族成員具有多種異構體。隨后一家生物制藥公司Onconova發(fā)現,他們公司生產(chǎn)的某種抗腫瘤藥物在臨床II期試驗中有起效的病例里有36%存在A(yíng)KT2異構體的明顯下降。
 
  腫瘤個(gè)體化治療的基礎在于能否發(fā)現有效的生物標志物,而信號通路關(guān)鍵蛋白在其中占了很大比重。全面了解信號通路關(guān)鍵蛋白,尤其是其活性形式的變化,將有助于更好地開(kāi)展腫瘤個(gè)體化治療。
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