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聚合酶鏈反應技術(shù)

聚合酶鏈反應技術(shù)概述

聚合酶鏈反應技術(shù)診斷幽門(mén)螺旋桿菌是否存在僅需微量的DNA,而不需要活菌存在(這不同于其他幽門(mén)螺旋桿菌檢測方法),它不僅可以檢測胃內幽門(mén)螺旋桿菌,還可望檢出胃以外部位,如牙斑、糞便內的幽門(mén)螺旋桿菌,還可用于流行病學(xué)調查,它的敏感性遠遠超過(guò)了其他方法,有利于確定細菌感染的來(lái)源及途徑,它是一種很有前途的幽門(mén)螺旋桿菌檢測方法。

聚合酶鏈反應技術(shù)正常值

  • 測定Hp無(wú)有關(guān)毒力因子基因的mRNA(信使核糖核酸)得存在。 

聚合酶鏈反應技術(shù)臨床意義

  • 異常結果:測定Hp有關(guān)毒力因子基因的mRNA(信使核糖核酸)的存在。
    需要檢查人群:消化性潰瘍,慢性胃炎患者。 

聚合酶鏈反應技術(shù)檢查方法

  • 1材料:標本采自經(jīng)胃鏡檢查確診的胃、十二指腸潰瘍、各類(lèi)胃炎及潰瘍合并胃炎病例,在距幽門(mén)口5cm內鉗取胃粘膜2份(每例檢查前2周停用抗HP藥物),分別作PCR及病理切片檢查,檢測HP。
    2研究方法:PCR技術(shù):采用廈門(mén)長(cháng)城生物工程有限公司生產(chǎn)的HPDNAPCR診斷試劑盒,DNA抽提采用水煮沸法,引物為尿素酶基因片段,其核著(zhù)酸順序為:引物1為5'-AAGCTTTTATTAGGGGTTT—3',引物2為5'-TTATTACGCTTC—3',擴增產(chǎn)物為456bP,94℃預變性5分鐘,94℃30秒,55℃30秒,72℃1分鐘共32個(gè)循環(huán),72℃延伸5分鐘,2%瓊脂糖凝膠電電泳20分鐘, BE染色在456bp出現條帶為陽(yáng)性, 根據陽(yáng)性帶亮度分別作、定量判斷。 

聚合酶鏈反應技術(shù)注意事項

  • 不適宜人群:
    1)凝血功能差者。
    2)胃血管瘤(質(zhì)軟)
    檢查前禁忌:
    1.檢查前一天避免吸煙,以免檢查時(shí)因咳嗽影響插管。
    2.要有成人親友陪伴,術(shù)前取下假牙。
    3.檢查前一天晚飯后不應再吃東西,檢查當天早晨不應再喝水。
    檢查時(shí)禁忌:1.告知醫生您的既往病史及藥物過(guò)敏史。
    2.囑病人在操作中不要做過(guò)多的吞咽動(dòng)作,防止唾液吸入氣道及引起喉頭疼痛。
    3. 向病人說(shuō)明胃鏡檢查的目的,鼓勵病人樹(shù)立信心,勿緊張,配合醫生順利完成檢查。抽取胃粘膜檢查即可。
    4.準備好基因片段,保證電泳完成。 

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